PCR技术所谓实时荧光PCR技术(real-time PCR,也常被称为荧光定量PCR,Q-PCR),是指在普通PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,**通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。在real-time PCR中,对整个PCR反应扩增过程进行了实时的监测和连续地分析扩增相关的荧光信号,随着反应时间的进行,监测到的荧光信号的变化可以绘制成一条曲线。在PCR反应早期,产生荧光的水平不能与背景明显地区别,而后荧光的产生进入指数期、线性期和最终的平台期,因此可以在PCR反应处于指数期的某一点上来检测PCR产物的量,并且由此来推断模板最初的含量。通过对一系列已知浓度的标准物质设定标准曲线,通过外标法,可对靶基因进行精确的定量分析。实时荧光PCR技术自产生以来,不断发展完善,到目前为止已经非常成熟了。标记方法由最初单一的染料法,发展到了特异性更高的探针法,因其在原普通PCR的基础上增加了特异性的结合探针,通过荧光信号的检测实现了实时监控,不仅提高了检测的灵敏度,更增加了PCR反应的特异性和准确性。实时荧光PCR技术具有技术成熟、成本低、准确率高、重复性好,检测速度快等优点,目前,实时荧光PCR技术已广泛应用于血液筛查、急性流行性传染病的快速诊断、慢性传染病的诊断及疗效监控、个性化治疗的基因诊断、遗传病诊断、肿瘤个性化治疗和病原体基因分型以及SNP检测等多个领域,在食品安全、水质监测、司法鉴定等方面也得到了最为广泛的应用。