HRM 技术是high-resolution melting analysis 即高分辨熔解曲线分析技术,是近年国外兴起的一种全新的突变扫描和基因分型的遗传分析方法。基于高效稳健的PCR 技术,HRM 不受突变碱基位点与类型局限,无需序列特异性探针,在PCR 结束后直接运行高分辨熔解,即可完成对样品突变、单核苷酸多态性-SNP、甲基化、HLA 配型等的分析。因操作简便快速,使用成本低,结果准确,实现了真正的闭管操作,HRM 技术受到普遍关注。HRM 应用1、SNP(单核苷酸多态性)的筛查。2、基因突变扫描,包括缺失、重复、点突变。3、新突变的筛查。4、甲基化的筛查。5、遗传育种中特定突变的筛查、未知突变的发现。6、HLA 基因组配型、等位基因频率分析、物种鉴定、品种鉴定、甲基化研究。7、法医学鉴定、亲子鉴定。8、动植物品质相关多态性位点的研究等。植物抗逆性,突变与性状关联性研究。HRM特点1、高通量:1 次可同时检测10-384 样本,适合大样本、多SNP、多突变位点及多位点甲基化的扫描。2、高敏度:肿瘤研究中低突变率样品基因突变检测,**检测到0.1%的突变样品基因突变,即检测到1000 个正常细胞中1 个突变细胞,适用于手术和其它微量组织中突变检测。检测灵敏性远高于“PCR+ 测序”的25% ,即100 个正常细胞中至少有25 个突变细胞,测序仅适用手术组织。3、特异性好:PCR 产物无需后续处理,特异性高达100% 。直接未知杂合突变鉴定准确性100%,特异性100% 。直接未知纯合突变鉴定准确性96%, 利用非标记探针快速基因分型法直接未知纯合子鉴定准确性100%。4、重复性好:重复性100%5、使用范围广:不受碱基位点局限,除可检出已知突变外,也能检测出未知突变。6、重复性好:样品PCR 和HRM 分析直接在同一管内进行,实现闭管操作,避免交叉污染。7、操作简便:只需设计特异引物,无需序列特异性探针,无需测序,也不受突变碱基位点与类型的局限。8、成本低:简化操作时间和步骤,大大降低成本,检测费用远少于测序、Taqman 探针技术。9、标本范围广:可用于新鲜或酒精固定、石蜡包埋的手术标本,也可用于微量的穿刺或活检标本、血液标本、粪便标本等非手术标本的检测。传统“PCR+ 测序”方法难以检测大部分不能手术的患者。10、其它:只检测PCR 样品中荧光强度的变化,不消耗任何PCR 样品,无污染,PCR 产物可以进行下游分析,非常适合于测序前的SNP、甲基化等预扫描筛查。